小鼠ELISA試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，往預(yù)先包被倉鼠組織蛋白酶捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成。顏色的深淺和樣品中的倉鼠組織蛋白酶呈正相關(guān)，用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度，計(jì)算樣品濃度。
小鼠ELISA試劑盒的注意事項(xiàng)：
1.使用前請(qǐng)保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完，請(qǐng)廢棄。
2.微量試劑運(yùn)輸中顛簸和可能的倒置，會(huì)使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請(qǐng)1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘，以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3.從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正常現(xiàn)象，微加熱至40℃使結(jié)晶溶解后再配制洗滌液。（加熱溫度不要超過50℃）使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫。
4.不同批號(hào)的試劑盒組份避免混用（洗滌液和反應(yīng)終止液除外）。
5.充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要，好使用微量振蕩器(使用zui低頻率)，如無微量振蕩器，可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。
6.在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測(cè)時(shí)建議作雙孔檢測(cè)。
7.試驗(yàn)中所用的試管和吸頭均為一次性使用，嚴(yán)禁在不同的液體之間混用！否則將影響試驗(yàn)結(jié)果。
8.試驗(yàn)中請(qǐng)穿著試驗(yàn)服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測(cè)血液或者其他體液標(biāo)本時(shí)，請(qǐng)按國家生物試驗(yàn)室安全防護(hù)條列執(zhí)行。
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